本项目以斑节对虾为研究对象,通过构建的卵巢cDNA文库,采用EST、RACE等技术筛选得到HSP90及其分子伴侣蛋白CDC37、靶蛋白PLK1全表达序列、细胞周期蛋白B及其调控相关基因cyclin H、cyclin E、cyclin Y、Cyclin T、Cyclin C等基因的全表达序列。利用生物学软件分析了基因的结构特征,确定了所克隆的基因的同源性,保证克隆的真实性。利用实时定量PCR技术和免疫组化方法分析了这些基因的表达特征,了解基因在卵巢发育中的作用。结果表明基因在卵巢中的表达量相对高于其他组织,而且在卵巢发育的不同时期表达量存在较大差异,而且在卵巢发育的关键时期表达量较高,说明基因可能参与了卵巢发育。免疫组织化学结果显示,cyclin B蛋白在卵巢不同发育时期的亚细胞定位区别很大,卵巢发育开始时位于细胞核内,发育时位于细胞核及细胞质内,而发育结束时位于细胞质内,说明蛋白在卵巢不同时期所起的作用会有所不同。MIH处理和眼柄切除后,Hsp90基因在卵巢中的表达出现了明显的变化。从以上研究结果可以看出HSP90基因不但参与了卵巢发育的调控网络,而且还在不同发育时期内发挥着重要的作用。研究结果不但丰富了斑节对虾卵巢发育的分子调控机制研究的内容,而且对深入了解卵巢发育分子调控机理提供了理论依据。