本项目通过提取人乳腺癌细胞MCF7中总RNA，反转录为cDNA后采用聚合酶链反应扩增NGAL基因，上下游分别引入NotI和EcoRI酶切位点，双酶切后将其插入p3XFLAG-CMV-14质粒中，并进行双酶切和测序鉴定，成功构建了p3XFLAG-NGAL真核表达载体。再采用脂质体法转染该质粒至MCF7细胞中，经Western Blot检测FLAG-NGAL融合蛋白在人乳腺癌细胞MCF7中高效表达。然后使用FLAG Pull-down 技术筛选并经质谱分析鉴定出人乳腺癌细胞MCF7中可能与NGAL存在相互作用的蛋白KRT1。