本发明公开了一种药物纳米制剂及其制备方法。该药物纳米制剂包括纳米载体，所述纳米载体为由亲水外链和疏水内核组成的核壳结构所述亲水外链为水溶性聚合物或水溶性多糖；所述疏水内核为聚酰胺‑胺，其表面吸附有siRNA，内部包埋有抗肿瘤药物和疏水性探针；所述亲水外链与疏水内核通过偶氮苯‑4，4‑二羧酸连接。本发明首次采用偶氮苯‑4，4‑二羧酸(AZO)连接甲氧基聚乙二醇胺(PEG)与聚酰胺‑胺(PAMAM)制备了一种低氧响应性的纳米载体，可用于共载化疗药物和siRNA；该纳米制剂不仅在肿瘤低氧微环境刺激下粒径减小，穿透性强；而且制剂工艺简单，对肿瘤细胞的毒性增加。