本发明涉及生物医药工程技术领域，提供了一种人肿瘤坏死因子Ⅰ型受体胞外区蛋白的制备方法，该制备方法包括如下几个大步骤：1)构建人TNFR1‑ECD的原核表达载体，并将其转化入大肠杆菌DH5α菌株内；2)诱导人TNFR1‑ECD蛋白在大肠杆菌中表达；3)人TNFR1‑ECD蛋白包涵体洗涤和变性；4)人TNFR1‑ECD蛋白的复性；5)人TNFR1‑ECD蛋白纯化，使得本发明的人源TNFR1‑ECD蛋白能够在大肠杆菌细胞中表达，通过菌体破碎后沉淀蛋白的变性、复性，镍柱亲和层析以及阳离子交换层析纯化得到，具有纯度高、生物活性显著、生产成本低且制备步骤简便的特点，适合于生物医药产业大规模生产。