一种走马胎的离体培养快速繁殖方法，步骤如下：在原MS培养基中添加FeSO4·7H2O、添加抗坏血酸、添加蔗糖、添加琼脂，制备得到改良MS培养基，将消毒外植体置于诱导培养基中进行诱导培养，诱导培养基的配方：以改良MS培养基为基础，添加IBA、6‑BA和KT；将走马胎不定芽接种于丛芽增殖培养基中，以改良MS培养基为基础，添加IBA、6‑BA L和KT；生根培养基的配方：以改良MS培养基为基础，将其中的大量元素的剂量调整为原来的一半，再添加NAA和IBA；最后走马胎再生植株进行炼苗、移栽。组织培养快繁技术能提供大量优质的走马胎种苗，满足市场需求，保护野生资源不受破坏，促进其在中医药产业中更好的应用。