本发明公开了一种南美蟛蜞菊花抗氧化提取物及其制备方法和用途。该提取物是在南美蟛蜞菊花的干燥粉末中加入溶剂提取；提取液经过滤、减压浓缩得到总提取物，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，减压回收分别得到石油醚部分、乙酸乙酯部分和水溶解部分，所得乙酸乙酯部分和水溶解部分具有优良清除DPPH自由基和抗油脂氧化活性，其中乙酸乙酯部分包含9个黄酮和4个苯丙素类化合物。本发明制得的提取物得率高，工艺流程简单，适合较大规模的制备。所述提取物具有优良抗氧化活性，可以作为活性组分应用于抗氧化药物和食品保鲜中。