本发明公开了一种金纳米笼和肌红蛋白修饰电极的制备方法及其应用，所述制备方法包括以下步骤：按照质量比(1.5～2.5) : 1取石墨粉与离子液体HPPF6，与液体石蜡置于研钵中研磨均匀，得到碳糊，将碳糊填入玻璃电极管中压实，内插铜丝作为导线，得到碳离子液体电极CILE；取6～10μLAuNCs溶液滴涂在CILE表面，室温条件下避光自然晾干，得AuNCs/CILE电极；再取6～10μL 10～20mg mL‑1Mb溶液滴涂在AuNCs/CILE电极表面，在室温下避光自然晾干，得Mb/AuNCs/CILE电极；最后取4～8μL 0.3～0.7％Nafion乙醇溶液滴涂在Mb/AuNCs/CILE电极表面，室温下避光晾干后，即得Nafion/Mb/AuNCs/CILE电极。本发明制得的修饰电极对三氯乙酸、亚硝酸钠以及过氧化氢电催化还原效果良好，线性范围广，检测限低，灵敏度高，可很好应用于检测这三种物质在目标物中含量。