本发明公开了一种用于检测三氯乙酸(TCA)或亚硝酸钠(NaNO2)的纳米电化学酶传感器及其制备方法和应用，其中纳米电化学酶传感器所选择的基底电极为碳离子液体电极(CILE)，在CILE表面修饰有包括镁金属‑有机骨架纳米材料(Mg‑MOFs‑74)、纳米金颗粒(AuNPs)和肌红蛋白(Mb)组成的复合膜，复合膜表面组装Nafion膜。其制备方法，包括修饰Mg‑MOFs‑74、电沉积AuNPs、组装Mb和Nafion膜等步骤。本发明构建了可用于检测TCA或NaNO2的纳米电化学酶传感器，能够分别检测两种目标物质，检测范围宽和检测限低，可用于测定含有TCA或NaNO2的样品。