本发明涉及一种用于细胞成像的罗丹明衍生物荧光探针及其制备方法，所述制备方法包括如下步骤：将化合物1与化合物2溶于CH2Cl2中，在Fe(acac)3和Et3N的作用下得到式I化合物；其中化合物1与化合物2的摩尔比为1 : 0.8‑1.0，Fe(acac)3的摩尔用量为化合物1的0.10‑0.12倍，每毫摩尔化合物1使用CH2Cl2的体积为12‑15mL，使用Et3N的体积为0.5‑0.6mL。反应温度优选在室温下进行，反应时间优选20‑24小时。