本发明公开了一种利用咖啡渣制备的蘑菇培养基；包括干料和水，以干料重量为100计，所述干料由如下重量百分比含量的各组分组成：咖啡渣20～50％，棉花籽28～58％，麸皮15～20％，石膏1～2％，石灰1～2％。其制备具体为：回收并集中废弃的咖啡渣，干燥处理，粉碎至直径为0.1～0.5cm；将粉碎后的咖啡渣与棉花籽、麸皮、石膏、石灰按所述重量配比混合均匀，加入水使得含水量为60～70％，制得初料；初料经1.5kg/cm2、121℃灭菌1～1.5小时，冷却，即可。本发明用咖啡渣代替木屑部分提供纤维素等必备组分，菌菇生长速度加快，由于利用了咖啡渣的物理及化学吸附，菌菇重金属含量降低，无农药残留。