一种冻罗非鱼片品质测定方法，包括如下步骤：1)运用切片机处理不同保存条件下的罗非鱼片，制取其组织切片；所述切片符合光学冷冻切片要求，2)对制得的切片染色，得到物料的显微图像，染色过程需根据处理材料不同而适当调整，以得出更清晰的组织与组织间隙二色图；3)根据得到的显微图像，求取分维度；4)以分维度为依据评价物料的品质，其中新鲜鱼片的维度不小于1.955，腐败鱼片的维度不大于1.800，维度数值越大，鱼片越新鲜，数值越小，鱼片越腐败。本发明通过光学显微镜下冻罗非鱼片的分维度值评价罗非鱼品质，方法操作简单，直观形象的检测食品组织微观结构，并易于量化，具有很好的市场应用价值和推广价值。