本发明公开了一种半抗原及其制备方法和应用，具体涉及一种多杀菌素半抗原。本发明还公开了所述多杀菌素半抗原的制备方法及其应用。本发明提供的多杀菌素半抗原既最大程度地保留了多杀菌素的化学结构，又通过化学合成改造引入了可以与蛋白质偶联的‑COOH，合成方法简单，产物纯度、得率较高；用该半抗原作为原料制备适于动物免疫的抗原体系，免疫动物后所得抗体效价、特异性、亲和力均较好，可用于制备酶联免疫试剂盒；该试剂盒操作简单、检测成本低、检测方法高效、准确、快速，可同时检测大批量的样本，适于动物源性食品中多杀菌素残留的现场监控和大量样本的筛查。本发明的多杀菌素半抗原在多杀菌素的检测中发挥重要作用。