本发明公开了一种多倍体华石斛的培育方法。本发明保护多倍体华石斛选育方法，包括如下步骤：使用液相的诱变剂对华石斛原球茎进行诱变处理；所述诱变剂中含有浓度为0.1‑1g/L的秋水仙碱。本发明提供的方法整个过程在可控条件下进行，不受季节限制，还大大减少了嵌合体的出现，提高了鉴定效率，为获得优质华石斛新种质、解决华石斛人工栽培出瓶率低、加速华石斛良种的规模化栽培等提供理论依据和技术参考，同时还具有丰富药用种质资源、防止野生资源的过度利用等重要的现实意义。