本发明提供了一种橡胶树胚性愈伤组织的低温保存培养基及其低温方法，属于组织培养技术领域。所述低温保存培养基通过添加外源抗氧化剂L‑谷氨酰胺、抗氧化型维生素VC以及外源激素水杨酸；激发内源抗氧化酶谷胱甘肽还原酶GR作用以维持细胞内高比例的GSH/GSSG以及GR参与植物体内清除ROS关键途径抗坏血酸谷胱甘肽循环AsA‑GSH，辅以其他抗氧化酶，协同有效清除低温保存下的胚性愈伤组织内多余的ROS，以提高胚性愈伤组织抗低温胁迫能力。经低温保存培养基保存的胚性愈伤组织的愈伤组织存活率与对照25±2℃暗培养条件下的胚性愈伤组织相比无显著差异，且FDA荧光检测表明经低温保存的胚性愈伤组织细胞活力维持更强。