本发明提供苦丁茶冬青老叶提取熊果酸的方法，采用乙醇和石油醚等有机溶剂获得大量高纯度的熊果酸结晶，有效提高了熊果酸提取率，降低了因苦丁茶老叶没有充分利用而造成的环境污染风险。从苦丁茶冬青老叶提取的熊果酸能显著抑制人肝癌细胞HepG2的增殖。