专利名称 | 促皮质素与胰岛素样生长因子1融合蛋白及其制备方法 | ||
申请号 | CN201711074686.9 | 申请日 | |
公开(公告)号 | CN107880133A | 公开(公告)日 | |
申请(专利权)人 | 海南大学 | 发明人 | 王大勇; 黄永林; 裴业春 |
专利来源 | 国家知识产权局 | 转化方式 | 委托人转化 |
摘要 |
本发明涉及一种基因重组人促皮质素(ACTH)与胰岛素样生长因子1(IGF‑1)融合蛋白及其制备方法。本发明首先采用适合在工程菌中表达的优化密码子,构建了编码ACTH与IGF‑1融合蛋白的表达质粒:HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1 pET30a质粒,编码序列(CDS)中包含组氨酸标签(HisTag)序列、连接序列(linker)、肠激酶底物(EKst)序列以及ACTH和IGF‑1序列。在大肠杆菌表达菌株BL21‑DE3中诱导表达后,用镍(Ni)柱从破碎溶解的包涵体中分离纯化出HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1多肽链,之后用带有组氨酸标签的肠激酶切下HisTag‑linker‑EKst片段,然后再用Ni柱除去肠激酶和HisTag‑linker‑EKst片段,得到ACTH‑IGF‑1融合蛋白。 |
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