本实用新型公开了一种培养皿封口膜扎孔器，包括压紧板、活动板和针头，所述压紧板、活动板均为与培养皿开口相匹配的圆盘形，所述压紧板内设有针孔和第一弹性件，所述针头在所述针孔内滑动，所述第一弹性件将所述针头向上推动，所述活动板可滑动连接在所述压紧板上方。压紧板与封口膜紧贴，使封口膜处于紧绷的状态，防止扎孔过程将封口膜划破。