本发明涉及一种检测珊瑚白化病原溶藻弧菌XSBZ03和XSBZ14的引物对、试剂盒和检测方法。本发明的引物对包括上游引物F1和下游引物R1；上、下游引物F1、R1的序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明试剂盒包括上游引物F1、下游引物R1，2×PCR Master Mix，超纯水，阳性对照，阴性对照。本发明的试剂盒可同时快速检测珊瑚白化病原溶藻弧菌XSBZ03和XSBZ14，其特异性强、敏感性高、检测准确、耗时短，因此本发明对由XSBZ03和XSBZ14引起的珊瑚白化疾病诊断有较高的准确性，本发明对评估我国海域珊瑚的弧菌病害并制定有效的疾病控制措施具有指导意义。