本发明公开了一种通过冷冻干燥与硫醇‑烯点击化学制备的半胱氨酸功能化透明质酸结合物及其其合成方法，也公开了透明质酸结合物在制备可注射原位水凝胶的应用，还公开了可注射原位形成的水凝胶在培养胰岛细胞和胰岛素分泌的应用。本发明通过冷冻干燥和硫醇‑烯点击化学，得到一系列不同修饰率具有稳定醚键的半胱氨酸功能化透明质酸结合物，其具有巯基活性基团，可进一步功能化修饰；不同修饰率的透明质酸结合物与聚乙二醇结合物通过氧酯介导自然化学连接反应得到可注射原位形成的水凝胶，具有良好的流变学性质，其中游离的巯基能增加透明质酸的细胞黏附性，可作为细胞支架材料在胰岛细胞培养及刺激胰岛素分泌应用，具有广阔的生物医药前景。