本发明公开了基于硫醇‑烯点击化学的脂肪酸化肝素的制备及表征。该制备方法通过先分别合成巯基化的脂肪酸和带有双键的肝素‑烯丙基结合物两类化合物，再利用硫醇‑烯点击化学使巯基化脂肪酸中的巯基与肝素‑烯丙基结合物中的双键反应而将脂肪酸连接到肝素结构上，从而制备得到不同长链饱和脂肪酸修饰的脂肪酸化肝素结合物。并公开了使用核磁氢谱检测、抗Xa活性测定、元素分析、粒度分析和凝胶渗透色谱分子量测定对脂肪酸化肝素进行表征。本发明首次根据硫醇‑烯点击化学反应的优点和特色，将长链饱和脂肪酸应用于肝素结构修饰中，并保留了肝素的抗凝活性，为肝素的修饰提供了新的思路，对研究开发新的长效肝素类抗凝药物有着重要意义。