本发明公开了一种批量制备人工诱导雌核发育石斑鱼的方法，将批量紫外照射处理的鞍带石斑鱼稀释精液作为刺激源，与棕点石斑鱼卵子进行授精；激活后7分钟转入预先装有(4℃±0.5℃)海水的冷休克处理箱中，低温休克处理10分钟，使用多个冷休克处理箱可实现更大量的卵子休克处理；进行复温至常温处理，然后经孵化桶孵化；制备过程中使用对照组倍性分析数据对获得的胚胎进行检测，实现质量控制。通过本发明的方法，能够实现批量高效制备雌核发育石斑鱼纯系群体，为培育优良石斑鱼品种奠定基础。