本发明公开了一种用于海水提铀的重组蛛丝蛋白纤维材料的制备方法，包括以下步骤：将蜘蛛丝蛋白基因片段、海水提铀功能蛋白基因片段和柔性连接基因重组获得海水提铀重组蛛丝蛋白编码基因；后转入大肠杆菌，经蛋白表达、纯化获得海水提铀重组蛛丝蛋白液；浓缩使其浓度为100‑300mg/mL，将浓缩后的海水提铀重组蛛丝蛋白液推进纺丝液，自组装获得海水提铀重组蛛丝蛋白纤维；所述纺丝液的pH为3‑5。本方法工艺简单，条件温和，易于纯化，且通过本方法制备的海水提铀重组蛛丝蛋白纤维材料，力学性能优异，铀吸附能力强且选择性高，可多次重复使用。