本发明公开一种以肽聚糖水解酶pcsB基因为靶序列的环介导等温扩增快速检测无乳链球菌的方法，所述引物含SEQID.NO.1‑2的内引物，SEQID.NO.3‑4的外引物和SEQID.NO.5的环引物。其特征在于：1)64°C, 1小时LAMP反应，通过实时浊度仪可有效检测无乳链球菌的最低基因组模板量为1 pg，灵敏度是普通PCR电泳分析和荧光PCR的100倍。2)以SYBR Green I为显色试剂，LAMP反应1‑3小时可对1 ng模板的无乳链球菌进行准确检测。