专利名称 | 一种维氏气单胞菌总RNA提取方法 | ||
申请号 | CN201910718808.6 | 申请日 | |
公开(公告)号 | CN110468124A | 公开(公告)日 | |
申请(专利权)人 | 海南大学 | 发明人 | 刘柱; 盛强龙; 唐燕琼; 李宏; 马香; 孙愉宸 |
专利来源 | 国家知识产权局 | 转化方式 | 委托人转化 |
摘要 |
本发明涉及一种维氏气单胞菌总RNA提取方法,包括如下步骤:取处于对数生长期的维氏气单胞菌,离心,弃掉培养基,加溶菌酶,振荡均匀,其中,溶菌酶的添加量为300μL,溶菌酶的浓度介于3‑12mg/mL;加入900μL的Bμffer Rlysis‑B溶液,室温放置3分钟;加入200μL的氯仿,充分混匀,12000rpm、4摄氏度离心5分钟,取上清液;加入上清液体积1/3的无水乙醇,充分混匀,室温静置3分钟或在‑20摄氏度下放置30min后,12000rpm、4摄氏度离心5分钟,小心倒掉上清液;以为700μL、浓度为75%的乙醇溶液洗涤沉淀,离心,小心倒掉上清液;室温倒置离心管,尽可能使残存的乙醇彻底挥发,加入30‑50μL DEPC水溶解沉淀,立即使用或‑70摄氏度长期保存。 |
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