本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的石莼多糖及其制备与应用，其是先利用CO2超临界萃取法分离获得石莼粗多糖，再脱色素、除蛋白、纯化后得到纯度高的石莼活性多糖，其提取率达20%以上。经动物药效学证实，所得多糖在KM小鼠体内对H22肝癌瘤具有显著的杀伤能力，且无明显副作用，是一种无毒性、副作用小、十分安全的生物活性物质，可以方便和药学上可接受的载体制备成各种剂型的药物，或制作成功能食品。