本发明涉及一种重组人PM/Scl100融合蛋白的制备方法，合成人PM/Scl100基因并在两端添加酶切位点后，亚克隆至克隆载体构建重组质粒；将重组质粒经限制性内切酶消化后，在T4连接酶的作用下，与经过相同限制性内切酶消化后的真核表达载体连接，然后转化大肠杆菌JM109，获得重组载体；将重组载体转化大肠杆菌DH10Bac，获得重组杆粒；将重组杆粒转染进入SF9细胞制得杆状病毒；将杆状病毒转染进入SF9细胞获得重组蛋白；对重组蛋白进行纯化获得所述的重组人PM/Scl100融合蛋白。本发明能够高效表达、生产重组人PM/Scl100融合蛋白，获得的重组人PM/Scl100融合蛋白的纯度高，收率高。