本发明涉及鸭瘟病毒UL56基因3’端缺失和LORF5基因缺失突变株及其构建方法与应用，本发明提供一种UL56基因3’端缺失和LORF5基因缺失的重组鸭瘟病毒毒株，该毒株具有减弱的毒力，对鸭无致病性，且具有良好的免疫原性，能够实现抗鸭瘟病毒的免疫保护。本发明提供的减毒鸭瘟病毒毒株能够用于制备鸭瘟活疫苗，或作为活病毒载体经插入其它病原的抗原基因制备基因工程活载体疫苗，具有很大的应用潜力和市场。