本发明提供一类环胆烷羧酸酯衍生物及其制备方法，以及其在工业化制备25‑羟基胆固醇(1)中的用途。式I所示的环胆烷羧酸酯衍生物，R1为直链或者支链的C1‑C12烷基；R2为甲基或乙基。本发明提供的25‑羟基胆固醇(1)合成工艺路线，起始原料豆甾醇价廉易得、商业化来源可靠。尤其，在构建25‑羟基胆固醇(1)的17位侧链时，反应条件温和，反应步骤简洁；无需特殊和危险试剂，无需苛刻反应条件；无需冗余反应步骤；无需色谱分离纯化；有利于工业化生产，相比现有技术具有显著进步。