本发明提供了一种中和贝伐珠单抗的单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体的轻链CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO.3，轻链CDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO.4，轻链CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO.5；所述单克隆抗体的重链CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO.6，重链CDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO.7，重链CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO.8；本发明通过大量复杂实验筛选并验证了所述单克隆抗体能特异性结合贝伐珠单抗，并能够阻断贝伐珠单抗与VEGF结合，该抗体能够研究贝伐珠单抗在临床前和临床试验中的免疫原性，监测评估免疫原性试验的敏感性和特异性，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。