本发明涉及胃泌素17时间分辨微球免疫层析检测试剂卡及其制备方法，检测试剂卡包括PVC底板，在PVC底板上依次连接有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合垫喷有用化学试剂和表面活性剂复溶的不同粒径时间分辨微球标记的抗胃泌素17标记抗体及时间分辨微球标记的鸡IgY；硝酸纤维素膜T线位置包被有抗胃泌素17包被抗体，C线位置包被有羊抗鸡IgY。与现有技术相比，本发明可以方便，迅速的检测出不同浓度的胃泌素17，并且检测结果可靠的，灵敏度可以达到市场要求。