本发明涉及一种CST1化学发光检测试剂盒及其检测方法，属于免疫诊断领域，其试剂盒包括链霉亲和素偶联磁珠、生物素标记的捕获抗体、吖啶酯标记的检测抗体、预激发液和激发液以及洗涤浓缩液；本发明检测试剂盒利用磁分离以及吖啶酯直接化学发光检测法的优势，使检测过程简单、易于操作、便于自动化；同时本发明使用的单抗作为捕获抗体和检测抗体，使得试剂盒还具有灵敏度高、特异性好、检测限低及稳定性好等特性，线性范围达到6.25～1600U/mL，最低检测限可达1.5U/mL，能够用于检测CST1蛋白过量表达或诊断以CST1蛋白异常表达为表征的疾病的产品的应用。