本发明提供了一种检测肠致病性大肠杆菌的核酸适配体电化学传感器，包括通过S‑Au键连接于金电极表面的捕获探针，以及与捕获探针杂交形成双链的信号探针；本发明还提供了所述传感器的制备方法以及其应用。采用本发明实施例提供的核酸适配体电化学传感器，可以用于肠致病性大肠杆菌的检测，采用该传感器检测肠致病性大肠杆菌，与现有检测方法相比，用时较少且操作更加便捷。