本发明公开了一种可溶性重组蛋白的制备方法。所述方法将所要研究的目的蛋白与具有硫氧还蛋白和His标签融合表达，通过优化表达条件，可使目的蛋白的可溶性表达量显著提高，利用肠激酶酶切位点特性，通过两步亲和层析快速实现目的蛋白的纯化，纯度可达95％以上，与传统方法相比，本发明所述方法可使可溶性重组蛋白表达量显著提高，避免包涵体蛋白后处理复性及活性不稳定的麻烦，得到的重组蛋白生物学活性高且比较稳定，对于规模化生产高活性重组蛋白具有很好的应用前景。