本发明属于食品、医药和化妆品等技术领域，尤其涉及一种植物甾醇多元酸肌醇酯及其制备方法，本发明在有机相中使用脂肪酶催化合成了植物甾醇琥珀酸肌醇酯，得到植物甾醇琥珀酸肌醇酯的产率为64.7％，纯度为80.5％，本发明方法使用的酶法生产反应条件温和、步骤简单、所得产物纯度和收率高等特点，无需官能团保护，选用的原料、催化剂和溶剂也都可安全应用于食品中，对环境友好，产品安全性高。