本发明公开了一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用，该物质的系统命名为：N, N’‑二乙酰{(3R, 4R)‑4‑甲基‑3‑[甲基(7H‑吡咯并[2, 3‑d]嘧啶‑4‑基)氨基]哌啶‑1‑基}亚胺。该杂质在缩合反应过程中生成水平较低，但由于该杂质与托法替布的主要官能基团一致，在后续成盐、精制过程中的清除效果有限，对托法替布原料药及制剂成品的质量影响较大。通过检测该杂质的存在，可以有效确定托法替布原料及制剂的质量。