本发明公开一种水蛭唾液重复提取的方法，包括以下步骤：在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。该方法可实现连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。