本发明公开了一种用于生产罗米地辛的方法及发酵培养基。本发明公开了一种用于生产罗米地辛的发酵培养基，其包含碳源、有机氮源和无机磷酸盐；所述的碳源包括葡萄糖和甘露醇，所述的有机氮源包括玉米浆、干酪素和黄豆粉；所述的碳源占所述发酵培养基的含量为4%～10%；所述的有机氮源占所述发酵培养基的含量为2%～5%；所述的无机磷酸盐占所述发酵培养基的含量为0.1%～2.1%，以上含量均为重量含量。本发明还公开了一种用于生产罗米地辛的方法。本发明的发酵培养基用于生产罗米地辛时，产量提高到500～600mg/L，较现有技术中的发酵培养基提高了150%～200%以上。