本发明公开了一种具有抗肿瘤作用的丁香水提取物的制备方法及其应用。本发明公开的丁香水提取物具有良好的抗肿瘤作用，对人多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用；体内裸鼠移植瘤模型结果显示丁香水提取物对人结肠癌细胞HT‑29和人胰腺癌细胞ASPC‑1有显著的抑瘤活性。由于本发明公开的活性组分是中药提取物，相对临床常用的化疗药物而言具有更小的毒副作用。因此，本发明公开的丁香水提取物具有成为新型抗癌剂或癌症化学疗法佐剂的开发潜力和应用前景。