本发明涉及抗生素生产技术领域，具体涉及一种达托霉素提取方法。包括如下步骤：步骤(1)将达托霉素发酵液进行陶瓷膜过滤；步骤(2)将过滤液过大孔吸附树脂收集洗脱液；步骤(3)将所得的洗脱液调上NM‑Q阴离子交换树脂洗脱，收集洗脱液；步骤(4)将步骤(3)所得洗脱液过反相硅胶NMsil‑C18柱，用醋酸铵乙醇溶液梯度洗脱柱子，收集洗脱液；步骤(5)将步骤(4)所得的达托霉素洗脱液浓缩，加入乙酸钙和异丙醇，放置，析晶，抽滤，烘干得达托霉素结晶粉。本发明的有益效果在于：本发明的达托霉素提取方法不使用剧毒性的乙腈溶液作为洗脱液，减少对环境和生产人员健康压力，并且酸碱调节试剂使用减少，降低了生产成本。