本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明应用基因工程方法，敲除基因zwf、malE，替换谷氨酸棒杆菌基因icdCg为变形链球菌Streptococcus mutans JH 1005中基因icdSm，达到重组菌胞内NADPH水平精确调控的目的。重组菌经LBG液体培养基摇瓶实验，重组菌胞内NADH含量由出发菌的1.97μmol(g DCW)‑1增加到2.73μmol(g DCW)‑1，胞内NADPH含量降低至0.15μmol(g DCW)‑1，明显低于出发菌胞内NADPH含量1.43μmol(g DCW)‑1。此发明成功阻断了谷氨酸棒杆菌中NADPH合成的相关途径，为构建可精确调控胞内NADPH水平的菌株提供崭新的思路。