本发明属于生物与新医药中轻工和化工生物技术的天然产物有效成份的分离提取技术，涉及提取与应用领域，具体为提供一种葛根总黄酮及多糖提取物的制备方法及应用。本发明提取前采用木瓜蛋白酶对葛根进行处理，促进各种有效成分的浸出。酶解处理后的葛根采用高压水提‑‑醇沉法提取多糖，显著缩短提取时间，提高效率，提高多糖提取率。葛根多糖提取后的滤渣利用乙醇沉淀后收集的乙醇滤液重复利用提取黄酮类成分，显著提高了葛根的利用率，也减少有机溶剂的使用，减少成本。采用超声‑微波辅助提取滤渣，提高葛根黄酮类成分的提取率。此外，本发明制备的葛根总黄酮及多糖提取物对肿瘤细胞增殖具有抑制作用。