本发明公开了三十四碳‑(20, 23)‑二烯酸的提取方法，属于医药应用技术领域。包括预处理、提取、浓缩、萃取步骤，其中，在预处理阶段，选用60～100目的银柴胡颗粒，增加提取溶剂与银柴胡的接触面。使用恒温的提取环境，降低物质沸点，提高银柴胡中有效组分的提取效率，提高三十四碳‑(20, 23)‑二烯酸得到率。同时，通过定温浓缩及定温萃取，进一步提高三十四碳‑(20, 23)‑二烯酸得到率。实验验证，上述方法提取的三十四碳‑(20, 23)‑二烯酸在抑制肿瘤细胞生长尤其是在抑制胃癌肿瘤细胞生长中，有着显著的抑制活性，对胃癌肿瘤细胞的抑制率达到50%以上。