本发明公开了一种测定硫辛酸注射液中乙二胺含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)流动相的制备；将磷酸氢二钾溶液用磷酸调节pH值至9.0后，过滤，加入乙腈，混匀后进行超声处理，得到流动相；2)对照品溶液的制备；将称量好的乙二胺置于容器中，加水稀释，得到浓度范围为3.75mg/ml～11.25mg/ml的乙二胺溶液；3)供试品溶液的制备；取硫辛酸注射液样品溶液，作为供试品溶液；4)测定；将步骤2)中得到的对照品溶液注入液相色谱仪进行测定，得到标准曲线；将步骤3)中得到的供试品溶液，注入液相色谱仪进行测定；所述测定过程中：色谱柱为waters X‑bridge Amide 4.6mm×150mm，3.5μm；流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为30℃～40℃；进样量为10μl；采集时间为15min；检测器为示差折光检测器；检测器温度为40℃。