本实用新型公开了一种钙离子成像细胞灌流槽，包括槽体和槽盖，槽体上设有盖玻片放置槽，盖玻片放置槽的底面中部设有供钙成像激发光装置照射细胞爬片的透光孔，槽体的两端均设有进液孔，槽盖包括嵌于盖玻片放置槽中的凸起部，凸起部的中部设有爬片观察孔，凸起部中还设有连通爬片观察孔和各进液孔的若干进液通道，还设有液体缓冲池，使用时先将盖玻片置于盖玻片放置槽中并封住透光孔，而后将细胞爬片放置在透光孔上方的盖玻片上，再将槽盖盖紧，凸起部压紧细胞爬片，灌流的液体先存储在液体缓冲池中，而后缓速流入爬片观察孔中，避免直接冲击细胞爬片，从而减少对细胞的损伤，此实用新型用于生物实验器材领域。