本发明属于药物分析领域，具体公开了一种盐酸缬更昔洛韦中间体缩合物对映异构体的HPLC检测方法，该方法使用以纤维素‑三(4‑氯‑3‑甲基苯基氨基甲酸酯)涂覆硅胶为填充剂的手性色谱柱，并以水和腈类混合溶液作为流动相，柱温为10~20℃，流速为0.4~0.6ml/min，波长为250~260nm。本发明实现了对盐酸缬更昔洛韦中间体缩合物四种异构体的有效分离，检测结果准确性好、灵敏度高、操作简便、成本低，分析时间短，为盐酸缬更昔洛韦中间体缩合物的质量控制提供了保障。