本发明公开了一种抗尿素酶B亚单位的纳米抗体及核酸分子和应用，涉及纳米抗体技术领域。本发明公开的抗尿素酶B亚单位的纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，该纳米抗体具有与尿素酶B亚单位特异性结合的活性，可以用于检测幽门螺旋杆菌与抑制幽门螺旋杆菌的活性；此外该纳米抗体还具有分子量小、亲和力高、结构和性能稳定等特点。