本发明涉及一种低蛋白无血清细胞培养基，所述培养基包含基础生理缓冲剂混合物和蛋白成分；所述蛋白成分包括牛血清白蛋白、转铁蛋白、胰岛素，且所述蛋白成分的总添加量不超过30mg/L。该培养基仅含的三种蛋白类成分含量很低，有利于产物的分离纯化，提高产品的品质；成分明确、配制方便，适合于规模生产应用；能良好支持杂交瘤细胞，提高杂交瘤细胞的最高细胞密度和抗体产量。