本发明提出了一种荧光免疫层析卡的制备方法及荧光免疫层析卡，该方法包括ZnS量子点标记抗体的制备，并将制备的ZnS量子点标记抗体冷藏；通过S1步骤制备的ZnS量子点标记抗体进行ZnS量子点标记抗体检测液的制备，并将制备的ZnS量子点标记抗体检测液冷藏；制备包被有检测抗体的反应膜；通过S3步骤制备的反应膜制备试纸板，并就将制备完成的试纸板与试纸卡组合；该卡包括PVC板；反应膜设置在PVC板上；吸水垫设置在反应膜上；检测区和控制区均设置在吸水垫上，并相邻设置；本发明提出的荧光免疫层析卡的制备方法及荧光免疫层析卡具有便捷快速、灵敏特异等特点，使得血管内皮生长因子成本降低的同时更加便捷。