本发明属于生物医药技术领域，涉及一种药物抑菌活性的检测方法，具体涉及一种溶菌酶的抑菌活力检测方法，本发明还包括相关的试剂和试剂盒。本发明在检测体系中发挥溶菌酶的最大抗菌活力，采用缓冲液代替无菌水配制溶解液和稀释液，并优化检测试剂和样品的加入时间，该检测方法简单易行，可以大批量进行试验，使用设备和容器具简单、常用，不需要特别的设备，而且能够有效的体现溶菌酶的抗菌活力。