本发明提供生物偶联方法及用於其中之化合物该生物偶联方法包括使含有第一不饱和官能基之生物分子与包括第二不饱和官能基之有效载荷药偶联之步骤，其中该等第一及第二不饱和官能基彼此互补，从而偶联系该等官能基经由形成环己烯环之狄尔斯-阿尔德反应(Diels-Alder reaction)进行之反应